談?wù)勑鹿诓《竞怂釞z測和抗體檢測

近日鐘南山院士指出：增加對核酸檢測“假陰性”的補充，開展IgM/IgG抗體檢測。 

核酸檢測雖然是目前新冠病毒肺炎的確診指標(biāo)，但假陰性結(jié)果比較多檢出率僅30~50%，不少患者需進行多次檢測。為打贏這場疫情阻擊戰(zhàn)，目前已經(jīng)有100多家企業(yè)快速宣布研制成新冠病毒核酸檢測試劑盒，不少企業(yè)是上市公司產(chǎn)能可達100萬人份/天。但截止今天仍然有不少疑似病例等待核酸檢測確診，為什么還不能滿足疫情的檢測需要呢？  

?主要有以下幾點原因： 

1.核酸檢測的問題是質(zhì)量而不是產(chǎn)能 

一個三類注冊證病毒核酸檢測試劑正常需要3年左右時間準(zhǔn)備才能上市，100多家企業(yè)大概只花了十幾天突擊開發(fā)的產(chǎn)品可想而知其質(zhì)量很難把控，但為滿足疫情需要我們可以理解。不少企業(yè)短期內(nèi)能出產(chǎn)品得益于國家公布了病毒RNA序列，因此產(chǎn)品不少源自人工合成而不是病毒的自然呈現(xiàn) 

目前的產(chǎn)品嚴(yán)格意義上稱為實驗室產(chǎn)品，缺少臨床驗證、標(biāo)準(zhǔn)化的生產(chǎn)和質(zhì)控等最基本程序。一個檢測試劑盒性能的因素還是比較多的，比如說核酸提取試劑的堿性程度、擴增體系中的Mg2+濃度等等，如果沒有豐富的研發(fā)經(jīng)驗和技術(shù)積累，第一次做，還真有可能把控不好。 

2.樣本來源很難標(biāo)準(zhǔn)化 

樣本包括咽部、鼻咽部分泌物、痰液、支氣管、灌洗液、肺組織活檢、結(jié)膜、糞便等等。但我們知道病毒在個體和不同部位的拷貝數(shù)是不一樣的，很難標(biāo)準(zhǔn)化。相對于靜脈血以上采樣過程繁雜，要求不一，容易造成不同人員操作結(jié)果不一樣。本次援鄂人員中檢驗人員數(shù)量不多，因此擔(dān)心其采樣規(guī)范操作。 

3.檢測條件要求高 

實驗室需要三級甲等醫(yī)院，P3級別防護，認(rèn)證基因擴增實驗室。但我們知道除武漢以外，比如黃岡、天門等疫區(qū)條件是不足的，得送檢CDC這些都導(dǎo)致得不到及時檢測。  

需要PCR認(rèn)證人員操作，步驟繁瑣，期間需要多次離心，反復(fù)開蓋加樣等操作，全程需要5~8個小時。很難避免氣溶膠污染。酸樣本保存條件苛刻，RNA極易裂解，4℃僅可存放24h，但血清等進行抗體檢測的樣本可以存放72h。 

4.結(jié)果難以判讀 

如果是基因測序，雖然精度更高，但需要專業(yè)人員判讀，再考慮成本明顯這種方法不適合大面積篩查。 

5.商業(yè)層面 

國家特批的幾家企業(yè)產(chǎn)品目前需要緊急應(yīng)對疫情走了特批通道，國家直接采購簡而言之是一票制，傳統(tǒng)渠道很難參與進來，未來商業(yè)運作價值有待觀察。  

以上簡述了新型冠狀病毒核酸基因檢測的一些問題，相信經(jīng)過一定時間的摸索產(chǎn)品會逐步優(yōu)化。但疫情不等待，筆者寫文章的今天疫情發(fā)展仍然沒有明確出現(xiàn)拐點，全國已經(jīng)形成了以武漢，湖北為核心的散發(fā)態(tài)勢，全球都在重點防控新冠病毒。  

我們發(fā)現(xiàn)特別是武漢周邊的一些城市，比如黃岡，孝感，溫州等地方疫情嚴(yán)重，但醫(yī)療診治條件是遠遠比不上武漢的。因此國家出臺了一系列激勵企業(yè)科研創(chuàng)新措施，急需便攜和快速檢測的設(shè)備以滿足各種場景新冠病毒篩查防疫所需。 

我們看到市場上已經(jīng)出現(xiàn)了IgM/IgG抗體快速的檢測產(chǎn)品，目前抗體檢測方法包括以膠體金或免疫熒光層析為代表的POCT檢測法和化學(xué)發(fā)光法。POCT的優(yōu)點是：1）可滿足臨床科室及床旁檢測需求；2）可快速檢測，在15分鐘內(nèi)出結(jié)果，且操作簡單方便，其快速方便檢測可顯著提高檢測效率；3）用單人份試劑條可避免樣本之間的交叉污染；4）使用血清檢測樣本可降低醫(yī)護人員暴露風(fēng)險。化學(xué)發(fā)光技術(shù)的優(yōu)點是：1）早期快速檢測，30分鐘內(nèi)出結(jié)果；2）高通量，每小時能檢測幾十個到幾百個樣本；3）可定量檢測，且具高靈敏度。對于抗體濃度呈弱陽性患者能檢出，可防止錯漏。  

血清學(xué)IgM/IgG抗體檢測對發(fā)熱病人進行快速初篩，可提高疑似病例確診率。如針對無癥狀人群大規(guī)模篩查，通過檢測IgM、IgG，有利于早期檢出，可作為核酸檢測的一個互補。 

臨床意義：新型冠狀病毒 IgM是初次體液免疫應(yīng)答中最早出現(xiàn)的抗體，血清中IgM升高，提示新近發(fā)生感染，可用于新型冠狀病毒急性期感染的早期診斷。 IgG抗體檢測是對病例的感染狀況進行確認(rèn)。 

總之，新冠病毒抗體檢測可作為熒光定量RT-PCR核酸檢測的一個互補，它們的聯(lián)合檢測將會顯著提高檢測的靈敏度，減少誤診率或漏診率。